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如何提高制作母种培养基的质量

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如何提高制作母种培养基的质量

发布日期:2020-02-28 作者: 点击:

制种是食用菌生产中的关键环节,菌种好坏直接影响食用菌的产量和质量。菌种的好坏又取决于多个因素,如培养基的制备、种源质量、接种技术、保存条件等等。按菌种培养的不同阶段,可分为母种、原种和栽培种三类。母种质量的优劣直接影响到原种和栽培种的质量,所以说在把关母种质量环节上;各种影响因素显得尤为重要。母种培养基的制备看似简单,要真正做好也非易事。现在有许多栽培户自己制作母种,由于香菇脚批发制作规程不严格,极易出现问题,又由于缺乏系统的专业知识,出现问题也不会解决,致使菌种污染,造成损失。现就如何提高制作香菇脚批发母种培养基的质量,通过制作过程中的几点注意事项进行阐述,希望给从事菌种制作的技术人员和食用菌栽培户提供借鉴和帮助。

马铃薯培养基(PDA)适合多类食用菌菌丝生长,在制备母种培养基中多以PDA为主,现以PDA为例阐述母种培养基制备中的几点注意事项。在PDA的制作过程中一般分为材料准备、培养基制作、培养基分装、灭菌、冷却五个步骤。以下就每个步骤注意事项分别进行阐述:

1材料准备

1.1注意在选取土豆时,应选用无生芽、无青斑的土豆,因为土豆芽部的毒素会影响到菌丝的生长,若在保存过程中土豆生芽,可将芽部彻底清除再用。

1。2在土豆去皮后,一般切成厚度为0。2cm的薄片,因为土豆片的大小、薄厚会影响相同时间内煮制的效果,如果切的较厚,煮制时间较短,就会影响土豆营养汁液的获取量,继而影响培养基的质量。一般0。2cm厚的土豆片煮制时间控制在10min为宜。

1。3在培养基制作中,要用到起凝固作用的琼脂条或琼脂粉,在实际操作中考虑到成本问题,多选用琼脂条,但琼脂条加热后不容易溶化,如果培养基中留有未溶化的琼脂条,就会影响到培养基的凝固效果。解决办法是将称量好的琼脂条用热水提前浸泡,让琼脂条充分吸水软化,便于加热溶化。注意:在夏季制备培养基时琼脂条的使用量可增加2~4g,便于高温时的凝固。

1.4注意在煮土豆片前的加水量,以做1000mL为例,在煮制之前要加水1200~1300mL,由于在煮制过程中水分会不断蒸发,致使部分水分散失,所以在煮制前将会蒸发散失掉的200~300mL水补充进去。这样避免因煮制好后水量不足,加入清水造成营养液稀释现象。

2培养基制作

2.1将切好的土豆片加入到1200~1300mL水中,先用大火煮至开锅后计时,再用文火煮10min后停火,冷却过滤。注意计时后用文火煮,不要盲目的认为大火煮制会将土豆中的营养全部煮出来,大火煮制不但会将土豆煮烂煮粘,还会把土豆中的大量淀粉混于营养液中,不利于过滤。注意文火煮制时,让水略微沸腾即可,锅盖虚掩防止水分大量散失。

2。2将煮好后的土豆汁液经4层纱布过滤,注意至少用4层纱布过滤,目的是为了将煮出的土豆营养液充分的过滤出来,并排除其他杂质。通过纱布过滤出超过1000mL营养汁,超过1000mL是为了在溶化琼脂的过程中弥补水分蒸发的缺失。

2.3在加热溶化琼脂阶段注意,加热溶化时火不要太急,用玻璃棒一边搅拌琼脂一边溶化,防止琼脂沉于锅底而糊锅。加热至沸腾时,将火调至文火继续加热搅拌,直到用玻璃棒从锅底挑不出未溶化的琼脂为止,注意保持营养液1000mL。

3培养基的分装

3.1要提前准备分装培养液的试管,并要注意:试管一定要刷洗干净(有条件的可用餐洗净或其它洗洁净),倒置沥干水分;成装试管的容器不要封闭,封闭的容器不利于水分散失(有条件的可用烘箱烘干)。试管中若残留水分会导致灭好菌的试管中水份过大影响接种和发菌。

3。2分装培养液时一定要在培养液温度较高时分装,不但分装速度快而且培养液不易凝固。培养液分装时一般采用医用胶皮管将培养液导流入试管,注意将胶皮管插入试管内一段距离,不要接触管口,不要将培养液粘到管口。一般试管的装液量占试管容积的2/5,以这个容量斜面摆放试管时,不致于斜面过短影响试管利用率或斜面过长接触到棉塞增加污染机率。

3.3将分装好的试管冷却一下进行棉塞封口,注意尽量用新做的棉塞,用过的棉塞在受潮后极易滋生杂菌。在制作棉塞时注意,由里到外将棉塞依次裹紧,不要松散,将做好的棉塞塞入管口内2/3,管口外留1/3,棉塞做的要松紧适宜,以将棉塞拔出管口听到砰的一声响为宜。注意在塞入棉塞前要将管口擦净,不要有残留的培养基,残留的培养基灭菌后不但会与管口粘合致使棉塞拔不出,而且在发菌过程中管口的培养基极易污染到杂菌。

3.4灭菌前一般要用牛皮纸将试管包裹(7支/把),牛皮纸隔水透气是最理想的灭菌包裹材料,也可重复使用。许多农户自己在制作试管时,为了降低成本一般采用报纸包裹,建议在用报纸包裹时采用双层报纸包裹,因报纸在灭菌中极易吸水破裂让棉塞暴露在空气中,增加污染机率。若将试管作为菌种保藏时,不建议用报纸包裹,因为报纸在0~4℃低温冰箱保存时,极易吸收冰箱内的湿气造成管口棉塞受潮,增加污染机率缩短保藏时间。


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