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西峡香菇菌种脱毒技术有哪几种?

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西峡香菇菌种脱毒技术有哪几种?

发布日期:2020-07-22 作者: 点击:

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随着组织培养技术的研究与开发,相继有脱毒土豆、脱毒花卉等应用于生产。这些经脱毒处理后的种苗,明显表现高抗性、高产量等预期的生产特性,深受农民朋友的欢迎。

近年来,西峡香菇病害甚多,至今尚无有效、专用的防治药物应用于生产。将植物的脱毒技术应用于西峡香菇生产,可有效抑制病害的发生。

所谓植物脱毒,是将植物茎尖生长尖端组织进行分离,将分离组织置于特定培养基中进行培养,从而获得脱离原体病毒、病菌的新生种苗。具体到西峡香菇的脱毒繁种,严格说来,一般的组织分离并不能达到使菌种脱毒的目的,这是由于子实体已生长至中后期,携带病毒、病菌的概率相当高,故脱毒效果不明显。而将西峡香菇尖端生长点进行脱毒,效果理想。

西峡香菇


具体的脱毒方法有两种:

1.菌丝尖端脱毒技术

使用规格为90毫米或110毫米的培养皿。无此规格培养皿时,也可改用规格为25毫米×200毫米的大型试管,但操作不太方便。先按常规制备母种培养基,装入三角瓶,棉塞封口,加皮纸包封;同时将培养皿洗净后用牛皮纸包好。二者同时进行灭菌处理。121℃下灭菌30分钟,待灭菌锅内压力为零时,取出灭菌物,放入事先消毒的接种箱。打开牛皮纸包封,一手持培养皿,一手持三角瓶,利用手指调控使培养皿上盖开启约1~2厘米,倒入培养基液体约10~20毫升,盖严。将培养皿平置,冷却后成一光滑平面,俗称平板。平板冷却至30℃以下时,接入待脱毒菌种。接种方法:挑取米粒大小的一块种源,接入平板边缘。接种后置于规定温度下培养〔视品种调控温度)。当菌丝萌发至长为2厘米时,用尖刃接种工具切取菌丝尖端1毫米左右,接入新制平板上。此为1次脱毒。一般可连续脱毒3~4次。脱毒次数越多,脱毒效果就越有保证。

2。原基组织脱毒技术

该技术大程度革除了原有组织分离时子实体处于生长中后期,携带病毒、病菌可能性极大等弊端,真正实现了分离尖端组织的脱毒目的。具体操作为:常规配制基料,调破氮比为30∶1。碳氮比不可小于25∶1,以免菌丝过度旺盛生长结成菌皮,不易现原基。大口罐头瓶洗净、备用。准备数块又11厘米×11厘米的纯棉纱布。装料至瓶口下1厘米时,从瓶口处铺上一层纱布,用平口螺丝刀将纱布边缘插至瓶下,使之紧贴瓶劈。封口灭菌、接种、培养等操作按常规进行。待菌丝发满瓶后,施行温差、湿差、光照等刺激,一般约7天即可现出原基。此时原基的形态是白疙瘩。待原基高至1厘米时,即可进行脱毒分离。将菌瓶用75%酒精擦洗后,移入已消毒的接种箱,箱内不再进行常规熏蒸。同时准备接种针(或接种钓)、多个刀片(以备交替使用),与菌瓶一同放入接种箱中,喷洒新洁尔灭以确保无菌操作。两手用75%酒精擦洗,伸入接种箱,将刀片进行灼烧灭菌后手持冷却。打开菌瓶封口,两手配合用无菌镊子取出原基。由于料面覆盖一层纱布,故不会将基料带出,操作方便。用刀片将原基表层削去约1毫米,然后用尖刃刀片将原基划切,使每块大小1毫米2左右。用接种针将分离的原基块移入平板或大型试管进行常规培养。操作要点:一是用刀片进行削、切时,每切一刀须更换一次刀片;二是分离块接入时须靠边缘投放,可接在平板的边缘或试管的前部,一般不居中接入。


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